该研究将增强型绿色荧光蛋白（EGFP）基因片段与抗菌肽牛乳铁蛋白肽（LfcinB-His）基因片段的N末端连接，构建以EGFP为报告基因的胞内表达载体，融合表达重组蛋白EGFP-LfcinB-His，并对其进行活性检测。将重组表达质粒电转入毕赤酵母GS115中，筛选阳性转化子，甲醇诱导其发酵表达，488 nm的激发光下检测到较强的荧光。当酵母细胞培养达到最高密度后，收集菌体细胞，破壁，用酵母细胞蛋白裂解液进行裂解。裂解液经过超滤浓缩、Ni-NTA亲和层析、甲酸裂解等纯化步骤后，Tricine-SDS-PAGE检测到相对分子质量为4.1 ku的目标蛋白（LfcinB-His）条带。通过液质联用测定与分析，最终获得了纯度为90.32%的LfcinB-His超滤浓缩液，对测试的6株致病菌均有不同程度的抑制作用，抑菌浓度范围在16～64μg/mL。综上，该研究为毕赤酵母表达小分子多肽提供了较好的方法学参考，也为进一步研究LfcinB的生物活性及高密度发酵奠定了基础。