家蚕核型多角体病毒(BmNPV)是血液型脓病的病原物,利用转基因技术来提高家蚕抗BmNPV的能力将促进抗病育种的快速发展。家蚕空泡型ATP酶c亚基(vacuolar-type ATPase subunit c,V-ATPase c)对BmNPV具有较强的抗病毒活性,本研究利用家蚕中肠特异表达基因BmSP25启动子(BmSP25p)驱动V-ATPase c在家蚕体内过量表达,构建pBac[A3-EGFP+BmSP25p-V-ATPase c]转基因载体,采用显微注射技术将此载体和辅助质粒注入家蚕早期胚胎中,在G1代通过绿色荧光筛选到阳性转基因个体。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)分析转基因阳性个体与对照个体中肠和丝腺组织内V-ATPase c基因转录表达情况,结果表明V-ATPase c在转基因品系中肠的转录水平比对照品系高39.58%,而在丝腺组织内V-ATPase c的转录无明显差异。转基因蚕与阴性对照家蚕共同添食BmNPV病毒粒子,利用vp39和gp41基因的表达水平衡量家蚕对BmNPV增殖的抑制效果。家蚕添食BmNPV 48 h后,转基因蚕体内vp39和gp41基因表达水平相比对照明显下降。以上结果表明,过量表达内源性抗病毒基因V-ATPase c可以显著增强家蚕的抗病毒抵抗力。