家蚕微粒子虫孢原质与家蚕BmE细胞互作表面蛋白的分离鉴定研究
家蚕微粒子虫(Nosema bombycis)能够通过其孢子和孢原质粘附并侵染宿主细胞,但其机制尚未阐明。为揭示家蚕微粒子虫孢原质与宿主细胞表面的相互作用,解析其分子机理,本研究利用生物素-链霉亲和素系统,对介导孢原质与家蚕BmE细胞粘附的表面蛋白进行了分离和质谱鉴定,并利用间接免疫荧光分析和免疫电镜等方法对候选蛋白进行亚细胞定位分析,进一步利用酵母双杂交系统对病原与宿主蛋白间的相互作用进行了分析。结果发现,本研究共获得32个家蚕微粒子虫孢原质膜蛋白和188个家蚕BmE细胞膜蛋白。对鉴定获得的家蚕蛋白进行KEGG分析发现,这些蛋白主要参与细胞膜运输通路。酵母双杂交实验结果表明,家蚕微粒子虫蛋白Nb1BD、Nb4BD和Nb6BD与家蚕膜蛋白Bm4AD和Bm6AD之间存在相互作用,暗示这些蛋白可能在孢原质侵染过程种发挥重要作用。本研究系统鉴定了家蚕微粒子虫孢原质与家蚕BmE细胞间互作膜蛋白,为解析微孢子虫孢原质的侵染机制的提供了重要数据参考。